分析科学学报

2017, v.33(04) 541-544

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近红外成像用于双向电泳前的蛋白质快速定量
Rapid Protein Quantitation in Pre Two-dimensional Electrophoresis by Near-Infrared Imaging

刘云;曹嵩;李科;李三华;宋长伟;覃成;朱欣婷;

摘要(Abstract):

双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳专用蛋白质定量试剂盒,但此类试剂盒价格高昂且操作繁琐,因此亟待开发一种快速、准确、成本低廉的蛋白质定量方法。通过研究发现,蛋白质溶液与考马斯亮蓝-G250混合后,在近红外荧光成像系统680nm波长下可以被激发出荧光,且当蛋白质浓度在0.01~0.2mg·mL~(-1)范围内时,其荧光强度与蛋白质浓度具有很好的线性关系。基于此特点,建立了一种以96孔板为载体,利用近红外成像技术对蛋白质样品进行定量的方法,该方法可用于双向电泳前蛋白质样品的快速定量。

关键词(KeyWords): 蛋白质定量;;近红外成像;;考马斯亮蓝;;双向电泳

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 贵州省科技厅社会发展攻关项目(黔科合SY字[2011]3031);; 遵义医学院招标项目(F-614);; 贵州省科技厅、遵义市科技局、遵义医学院联合基金(黔科合J字LKZ[2013]31号);; 贵州省教育厅特色重点实验室建设项目(黔教合KY字[2014]212)

作者(Author): 刘云;曹嵩;李科;李三华;宋长伟;覃成;朱欣婷;

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