以MOFs基模拟酶构建分子印迹光电化学传感器及其检测诺氟沙星的研究
丰芸;邓凯强;严龙;李嘉慧;章家立;刘永鑫;曾良鹏;杨绍明;基于聚邻苯二胺(PoPD)敏化碳量子点(CQDs)-金纳米粒子(AuNPs)@ZrMOF(Fe)复合材料,设计制备了一种检测诺氟沙星(NOR)的分子印迹光电化学传感器。以ZrMOF(Fe)过氧化物模拟酶为研究对象,为增强模拟酶的导电性与可见光吸收能力,与金纳米粒子(AuNPs)、碳量子点(CQDs)复合制备出CQDs-AuNPs@ZrMOF(Fe)复合材料。为实现对NOR的特异性识别,以NOR为模板分子、邻苯二胺(o-PD)为功能单体,用循环伏安电聚合的方法在修饰电极表面形成分子印迹聚合物(MIP),得到GCE/CQDs-AuNPs@ZrMOF(Fe)/MIP光电化学分子印迹传感器。优化实验条件后,该传感器对NOR的光电响应(I,μA)在0.5~150.0μg/L浓度范围内具有良好的线性关系,线性回归方程为I(μA)=0.049-1.114 lgc,相关系数为0.997,检出限(S/N=3)为6.9×10-8 g/L。该传感器具有良好的抗干扰能力和稳定性,可用于实际样品的检测。
银纳米颗粒修饰的纸基传感器可视化检测尿酸
胡晓涵;高宏霞;尤鹏霞;王昆;张绍岩;通过在二氧化硅(SiO2)薄膜改性的滤纸纤维表面沉积聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)稳定的银纳米粒子,成功制备出一种用于尿酸(UA)检测的新型纸基比色传感器。分别利用智能手机比色法及紫外-可见光谱法评估了传感器对UA检测的灵敏度,并对其抗干扰性和实际样品分析准确性进行了考察。研究结果表明,该纸基传感器用于UA的比色检测具有良好的灵敏度,其肉眼检测限为1μmol·L-1;两种分析方法在UA浓度为0.1~1000μmol·L-1的范围内均表现出良好的线性关系,检出限分别低至0.072μmol·L-1和0.063μmol·L-1。此外,该纸基传感器对于UA的检测具有显著的抗干扰能力,同时在实际样品检测中具有较高的准确性,加标回收率为84.8%~111.1%,相对标准偏差小于5.0%。该纸基比色传感器的开发为UA快速检测提供了一种低成本、高灵敏度的新方法。
一种不依赖于膜电位的线粒体黏度荧光探针的合成及性质研究
赵欣悦;黄程;吴运军;王慧;线粒体作为能量代谢和凋亡调控的关键亚细胞器之一,其黏度的异常变化与多种疾病密切相关。而现有线粒体黏度荧光探针普遍依赖线粒体膜电位(MMP),严重抑制其在病理条件下的应用。为解决上述问题,以吩噻嗪和噻吩基团作为供给电子基(D),乙烯基为π桥,吲哚衍生物作为受电子基(A),构建了一种D-π-A构型的新型荧光探针ZXY。利用紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱对探针的光物理性质进行研究。结果证实,探针ZXY具有优异的黏度响应性和选择性。共聚焦成像实验显示,探针ZXY靶向在线粒体部位不依赖于MMP,且对细胞内黏度变化监测具有高度灵敏性。
基于适配体和金纳米颗粒组装新型生物传感器“可视化”检测人乳腺癌MCF-7细胞
杨柳;刘丽莹;姜蒙;赵苗苗;郝峰;张万生;王艳艳;高鸿霞;乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤之一,早期诊断对于提高生存率至关重要。因此,本文构建了一种基于AS1411适配体和金纳米颗粒(AuNPs)的可视化检测平台,用于人乳腺癌MCF-7细胞的快速识别与定量分析。核仁素作为参与细胞调控的多功能蛋白,在乳腺癌细胞中存在差异性表达及定位变化,成为诊断乳腺癌理想肿瘤标志物。该平台通过AS1411对核仁素的特异性识别,实现了靶细胞诱导AuNPs聚集,导致溶液颜色由酒红色变为蓝色,实现无标记、可视化检测。该传感平台在10~1000个细胞/mL范围内与MCF-7细胞浓度呈良好线性关系,线性相关系数为R2=0.997,检出限为8个细胞/mL。本研究成功制备了低毒性、稳定性好,特异性强的适配体传感器,实现了对MCF-7细胞的灵敏检测,是乳腺癌快速诊断的理想工具。
基于氰基联苯胺衍生物半胱氨酸荧光探针的合成及应用
张玉;宋娟;关佳璇;项付端;穆群;王泽霖;魏纪帆;侯鹏;半胱氨酸(Cys)在人体生理代谢、抗氧化防御及疾病发生中具有重要作用,其精准检测对于疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。本研究针对Cys的检测需求,设计并合成了一种基于氰基联苯胺的新型荧光探针HDR,用于特异性识别Cys。HDR在与Cys反应后,产生强烈的蓝色荧光信号,检测限低至29.6 nmol/L,表现出良好的线性关系,具有高选择性、快速响应、高稳定性等优势,方法能够精确定量L-Cys胶囊中的药物含量。细胞成像实验进一步验证了HDR在活HeLa细胞中对Cys的实时可视化检测能力。
高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中7种新型杀虫剂和杀菌剂
孙千然;陈均;陈祥贵;苟圆;刘俊;建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS~/MS)同时检测7种动物源性食品(鸡肉、牛肉、鸡蛋、鱼肉、牛奶、脂肪、猪肝)中三氟苯嘧啶、氟嘧啶、乙基多杀菌素J、双丙环虫酯、四唑虫酰胺、氟唑环菌胺和苯嘧虫噁烷7种新型农药残留的分析方法。对样品前处理和色谱、质谱条件进行优化,结果显示,样品经90%乙腈水超声提取和分散固相萃取净化,采用HPLC-MS~/MS测定,7种农药在0.10~10 ng~/m L质量浓度范围内有良好的线性关系,相关系数r≥0.99,定量限(S~/N>10)为0.50~5.0_μg~/kg,样品在3个不同加标浓度水平下的回收率均在62.73%~117.62%之间,精密度和重复性测试的相对标准偏差(n=5)均在20%以内。该方法前处理操作快速简便,检测结果灵敏度高、准确性好,可满足动物源性食品中7种新型农药残留的检测要求。
网络药理学结合超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱研究赶黄草复方对酒精性肝损伤的保护作用机制
唐艺丹;曾里;段飞霞;贾利蓉;本研究基于超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)、网络药理学与分子对接方法,探究赶黄草复方对酒精性肝损伤(Alcoholic liver disease,ALD)的潜在保护作用机制。利用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对赶黄草复方的化学成分进行鉴定,结合TCSMP数据库、Swiss ADME及Swiss TragetPrediction数据库筛选活性成分及预测其潜在靶点,整合OMIM、Gene Crdsa及TTD数据库获得ALD的相关靶点,取两者交集得到交集靶点,构建蛋白互作网络图,进行GO和KEGG富集分析,并对核心成分与靶点进行分子对接验证。共鉴定筛选出442种成分,其中38种为对ALD有潜在保护作用的活性成分。与ALD相关的2773个疾病靶点交集获得287个潜在作用靶点。蛋白互作网络分析进一步筛选出SRC、HSP90AA1、PIK3R1、STAT3、PIK3CA 5个核心蛋白靶点,木兰花碱、番茄红素、芫花素等12个核心活性成分。GO富集结果涉及生物学过程(BP)1154条、细胞组分(CC)149条及分子功能(MF)404条,KEGG富集结果获得193条信号通路等,分子对接结果显示核心活性成分与核心靶点都具有良好结合能力,结合能均≤-5.8 kcal/mol。实验结果显示,赶黄草复方可能通过多靶点、多通路协同发挥对ALD的保护作用,为后续功能研究及赶黄草功能食品的开发提供理论依据。
脂肪组织中极性脂质提取方法的比较和改进
许丽娜;焦玉佩;王雪颖;王昱淞;刘晓蕙;脂肪组织中甘油三酯占比约90%,其超高丰度易导致质谱检测过程中信号饱和,严重抑制低丰度极性脂质的检出。针对这一挑战,本研究开发了一种新的异丙醇-甲醇(体积比,1∶3)提取脂质的方法,通过优化溶剂极性与提取流程,显著降低中性脂质的回收效率(甘油三酯信号较经典方法减少86.6%),有效缓解了高丰度中性脂对质谱动态范围的占用,从而显著提升磷脂、鞘脂等极性脂质的检测灵敏度。脂肪酸链组成分析进一步表明,该方法对不同碳链长度及不饱和度均无明显提取偏好性。本策略为高脂、高异质性生物样本的脂质组学精准分析提供了可靠技术平台,尤其适用于代谢性疾病模型中脂质代谢重编程机制及潜在生物标志物的深入研究。
超高效液相色谱-串联质谱法检测降糖类保健茶及其茶制品中非法添加的15种化学药物
吴琼;夏莹;江海;高卓瑶;励炯;柯春晖;丁献荣;建立了一种基于超高效液相色谱-串联质谱的高通量分析方法,可同时测定降糖类保健茶及其茶制品中15种非法添加化学药物。样品经含1 mg/L叔丁基对苯二酚的甲醇溶液提取后,采用氨基(NH2)固相萃取柱净化,并在WATERS CORTECS C18色谱柱上实现分离。以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子模式结合多反应监测进行定性定量分析。系统比较了4种前处理方式对15种化合物加标回收率的影响,优化了关键参数,并评估了恩格列净和达格列净的抗氧化性。结果表明:15种化学药物在各自浓度范围内线性关系良好(r2≥0.99),方法定量限低至2μg/kg;3个浓度加标回收试验,回收率为81%~109%,相对标准偏差为1.13%~8.21%。该方法前处理便捷,仪器的灵敏度高,重现性好,可为市售降糖类保健茶及其茶制品中非法添加药物的精准识别与风险监控提供可靠的技术支撑。
静态顶空-同位素内标-气相色谱/质谱法测定工业清洗剂中8种多环芳烃
霍炜江;李春燕;李学洋;张倩;建立了静态顶空-同位素内标-气相色谱/质谱联用法测定工业清洗剂中8种多环芳烃(PAHs),包括萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、苯并[a]蒽和■。样品经乙腈分散溶解,加入苊-D10、菲-D10和■-D12混合内标溶液,超声提取后取100μL上清液进行顶空分析。顶空进样有效避免了基质干扰,提高了方法选择性。乙腈作为分散剂对8种PAHs具有良好的顶空释放效果。优化后的顶空平衡条件为150℃、15min。实验结果表明,8种PAHs在0.50~20.0mg·L-1范围内线性关系良好,相关系数(R)2>0.997,方法定量限为3.7~5.6mg·kg-1;在10、20、100mg·kg-13个加标水平下,回收率范围为73.6%~125.9%,相对标准偏差为1.5%~13.9%。实验对20款市售工业清洗剂进行筛查,其中3款检出萘,最高含量达2.7×10~3mg·kg-1。所建立方法可为工业清洗剂中PAHs检测提供高效、准确的技术方案。
分子对接方法的应用与发展
段爱霞;陈晶;刘宏德;刘秀辉;卢小泉;分子对接方法加快了药物开发周期,具有快速、准确度高等优点。本文详述了分子对接方法的基本原理,及分子对接空间和能量的匹配要求和优化时的各种方法。综述了该方法在药物设计、药理分析和探测生命体系等方面的应用。
交联壳聚糖多孔微球对染料的吸附平衡及吸附动力学分析
丁世敏,封享华,汪玉庭,彭祺研究了交联壳聚糖多孔微球对染料的吸附平衡规律,探讨了染料溶液在不同的初始浓度、pH值及不同吸附剂用量条件下吸附动力学规律及吸附动力学控制机理。结果表明,壳聚糖微球对染料的吸附规律可较好地符合Langmuir吸附等温式,吸附动力学模型可以用表观二级速率方程来描述。
光谱法研究丝裂霉素、血清白蛋白以及金属离子间的相互作用
张勇,张贵珠,王月梅,卢继新用荧光光谱法研究了抗癌药物丝裂霉素 (Mitomycin C)与血清白蛋白的相互作用 ,以及一些金属离子对丝裂霉素与牛血清白蛋白 (BSA)相互作用的影响
分子对接方法的应用与发展
段爱霞;陈晶;刘宏德;刘秀辉;卢小泉;分子对接方法加快了药物开发周期,具有快速、准确度高等优点。本文详述了分子对接方法的基本原理,及分子对接空间和能量的匹配要求和优化时的各种方法。综述了该方法在药物设计、药理分析和探测生命体系等方面的应用。
用罗丹明B作标准物测定二氯荧光素的荧光量子产率
杨洗,潘祖亭,马勇以罗丹明B作荧光标准物用相对测量法测定二氯荧光素稀溶液的荧光量子产率,方法简单,结果准确,重现性好,操作条件简易可行且数据处理计算方便。
纳米材料在电化学生物传感器中的应用
扎热木.萨迪克;都颖;徐静娟;陈洪渊;纳米材料因其具有独特的性质,被广泛应用于研制和发展具有超高灵敏度、超高选择性的电化学生物传感器。本文总结了纳米材料在电化学生物传感系统中的主要功能,介绍了近年来国内外基于纳米材料构建的电化学生物传感器的研究进展,并对该领域的发展前景做出了展望。
紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用
郑健,陈焕文,刘宏伟,李宝华,张寒琦,于爱民,金钦汉本文着重评述了 1 998年以来国内紫外 -可见分光光度法在药物分析中的应用 ,展望了其在该领域的发展趋势。